【卡梅德生物】细胞永生化的方法介绍：hTERT永生化系统

心已赠人 2024-05-24 12:32 64阅读 0赞

[细胞的永生化][Link 1]通常涉及防止或逆转细胞衰老或衰老的自然过程，使人类细胞永生的一种常见方法是将人端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase ,hTERT）基因引入细胞中，用于创建永生细胞系，且与原代细胞特性相似，核型不改变，无致癌性风险。

端粒是位于真核细胞染色体末端的特殊结构，其长度与细胞分裂次数有关，每进行一次细胞分裂，端粒缩短一次，当端粒缩短到一定程度时，端粒不能保护染色体，细胞就会失去分裂能力，逐渐衰老。

端粒酶是可延长端粒末端的核糖蛋白酶，是逆转录酶，会以自身的RNA为模版，进行延伸端粒末端或合成新的端粒，从而维持端粒长度，以保证细胞的正常分裂。因此，端粒酶在维持端粒稳定、细胞的潜在增殖能力中有很重要的作用。

端粒酶逆转录酶（telomerase reverse transcriptase,TERT）可维持端粒酶的活性，将端粒酶逆转录酶导入原代细胞稳定表达，细胞容易永生化，目前研究最多的为将人端粒酶逆转录酶导入细胞，从而使细胞永生化。

以下是使用hTERT使细胞永生的方法概述：

1.hTERT基因的导入：第一步涉及将hTERT转基因导入靶细胞。这可以通过各种方法实现，例如病毒转导、转染或电穿孔。hTERT基因编码端粒酶，端粒酶负责维持细胞中端粒的长度。

2.端粒酶活性：一旦hTERT基因成功整合到细胞基因组中，它就开始表达端粒酶。端粒酶将重复的DNA序列添加到称为端粒的染色体末端。端粒通常随着细胞分裂而缩短，最终导致细胞衰老。

3.端粒维持：hTERT和端粒酶活性的表达确保端粒随着每次细胞分裂而维持甚至延长。这可以防止细胞衰老或达到Hayflick极限（细胞分裂次数的极限）。

4.永生化：由于端粒的维持，细胞可以无限期地继续分裂，有效地永生化。这些永生细胞可用于各种研究目的，包括研究细胞过程、药物测试和疾病建模。

值得注意的是，尽管永生细胞系是研究中有价值的工具，但它们可能无法准确地代表人体原代细胞的行为。此外，永生化细胞系的使用应仔细控制和验证，以确保其适用于特定的研究应用。

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